我玩mRNA的经历

本帖于 2021-09-06 14:49:59 时间, 由普通用户 吃与活 编辑

mRNA, 中文称信使核糖核酸,是细胞内合成蛋白质的模板。

mRNA极其容易降解。我们在提取RNA的时候要戴口罩,戴手套,用无RNA酶的器具,操作时不能用手接触头发,脸,如果忘了手套上就可能接触RNA酶。因为RNA酶在自然界到处都是,而且稳定,手上,头发上,口水里都有,要做到不污染RNA酶还是要费些力气的。保持提纯的mRNA要放在低温,短期负20度,长期保存要负80度。这大概就是美国的两种mRNA疫苗要低温保存的原因之一吧。

 

除了从动物组织中提取mRNA, 我们也制造mRNA。我们是先制造一个编码一个蛋白的DNA,然后在编码区的下游加上一段序列,然后加三十多个腺苷酸"尾巴",使mRNA在细胞中保持稳定。我们用反转录酶以线状DNA为模板合成mRNA,然后在mRNA的头部加上有"帽子",有"帽"有"尾",mRNA才稳定并能在细胞中指导蛋白质的翻译。我们一般是把合成的mRNA注射到非洲爪蟾卵母细胞中表达所要的蛋白质进行研究。

我靠这这些技术发现了一个重要基因/蛋白,但从来没有想到用类似的手段来生产抗体。所以得知美国在生产mRNA新冠疫苗时,对他们在几个星期内就完成设计生产并不意外,因为我知道从mRNA入手比从蛋白或灭活病毒入手要快得多,且安全得多,方便得多。

但是,到底疫苗有效果呢,这谁也不知道,直到临床试验出来结果才知道。但这种技术快是肯定的,将来肯定会大有应用前途,比如针对癌症病人特殊突变定制抗癌疫苗等。

尽管采取了一些措施,mRNA注射到体内是不稳定的,生产蛋白的时间很短。至于mRNA能不能整合到染色体上,改变基因什么的,那都是意想,在专业人员眼里不值一提。

所有跟帖: 

给个文献链接呗 -吃与活- 给 吃与活 发送悄悄话 吃与活 的博客首页 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 16:58:43

我问你的意思就是,知之为知之,不知为不知,不要没根据地发表看似有根据的言论。 -吃与活- 给 吃与活 发送悄悄话 吃与活 的博客首页 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 17:29:50

大概是学的是马克思哲学 -三丝- 给 三丝 发送悄悄话 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 19:02:31

癌症免疫不是仅仅产生抗体这么简单。 -tryyyyyy- 给 tryyyyyy 发送悄悄话 tryyyyyy 的博客首页 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 20:42:16

没看懂。特指癌症免疫疗法,还是癌症疫苗? -pickshell- 给 pickshell 发送悄悄话 (92 bytes) () 09/07/2021 postreply 03:32:56

看来吃兄真的被RNA玩过,对RNA的易降解印象深刻。 -业余城管- 给 业余城管 发送悄悄话 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 15:08:12

我对提纯mRNA是有些忌惮的,做砸过。多数时候我玩RNA,少数时候RNA玩我。 -吃与活- 给 吃与活 发送悄悄话 吃与活 的博客首页 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 16:57:37

如果转录成DNA,会不会稳定一些呢? -viewfinder- 给 viewfinder 发送悄悄话 viewfinder 的博客首页 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 16:39:02

DNA稳定,但需要打到细胞核里才能转录,然后才能合成蛋白。对生产疫苗而言,让DNA入核技术上做不到 -吃与活- 给 吃与活 发送悄悄话 吃与活 的博客首页 (209 bytes) () 09/06/2021 postreply 16:54:49

请解释印度DNA疫苗是怎么回事 -苦人不哭- 给 苦人不哭 发送悄悄话 苦人不哭 的博客首页 (128 bytes) () 09/06/2021 postreply 17:08:17

我不了解印度疫苗,也不想在这上面花时间。 -吃与活- 给 吃与活 发送悄悄话 吃与活 的博客首页 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 17:27:27

DNA用电脉冲法导入,效果大增 -xinxin76- 给 xinxin76 发送悄悄话 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 17:41:07

多种DNA疫苗早已用在兽用疫苗上。 -三丝- 给 三丝 发送悄悄话 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:10:43

楼主大概是90年代作的mRNA 工作吧,年代久远 -三丝- 给 三丝 发送悄悄话 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 17:55:51

很好奇如何“用反转录酶以线状DNA为模板合成mRNA” 是吗?那真是个重大发明 -三丝- 给 三丝 发送悄悄话 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 17:57:57

诺奖级的工作鸭,埋木了 -三丝- 给 三丝 发送悄悄话 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:01:00

我只知道逆转录酶是RNA为模板合成DNA -三丝- 给 三丝 发送悄悄话 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:02:56

与你共勉 知之为知之,不知为不知,不要没根据地发表看似有根据的言论 -三丝- 给 三丝 发送悄悄话 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:04:55

你是对的,是RNA聚合酶,不是反转录酶 -吃与活- 给 吃与活 发送悄悄话 吃与活 的博客首页 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 19:06:04

我还在想,你可能把酶的名字写错了。 -锅沿- 给 锅沿 发送悄悄话 (0 bytes) () 09/07/2021 postreply 04:49:42

当时在干木匠活,没细想,加之好久没亲自做RNA了,脑子也不好用了 -吃与活- 给 吃与活 发送悄悄话 吃与活 的博客首页 (0 bytes) () 09/07/2021 postreply 06:00:58

所以病毒基因是有可能进入染色体的,对吗?楼主好象认为绝无可能。 -周老大- 给 周老大 发送悄悄话 周老大 的博客首页 (0 bytes) () 09/07/2021 postreply 01:13:11

应该有这种可能,什么事情没有绝对,机率不知道多少。 -锅沿- 给 锅沿 发送悄悄话 (0 bytes) () 09/07/2021 postreply 04:56:39

不懂不要随便发言为好。 -吃与活- 给 吃与活 发送悄悄话 吃与活 的博客首页 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:40:08

多谢这位专业的帖子。我们知道疫苗是临时抱佛脚,可是看了半天,也没有看出来,疫苗到底有没有用。 -honeydue- 给 honeydue 发送悄悄话 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:03:29

现在不是测出抗体了吗? 就是有用吧 -FollowNature- 给 FollowNature 发送悄悄话 FollowNature 的博客首页 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:07:00

这位有些mRNA的工作经验,但对于mRNA vaccine 可以说10窍通了9窍 -三丝- 给 三丝 发送悄悄话 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:57:35

臆想 -dudaan- 给 dudaan 发送悄悄话 dudaan 的博客首页 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:32:49

专等杜编指正 -吃与活- 给 吃与活 发送悄悄话 吃与活 的博客首页 (60 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:39:06

谢谢吃与活的介绍,能否悄悄话告诉 -street0120003- 给 street0120003 发送悄悄话 (172 bytes) () 09/07/2021 postreply 03:54:54

-吃与活- 给 吃与活 发送悄悄话 吃与活 的博客首页 (200 bytes) () 09/07/2021 postreply 06:06:11

唉,良心债欠多了,岂不心虚耶? -米兰之夜- 给 米兰之夜 发送悄悄话 米兰之夜 的博客首页 (177 bytes) () 09/07/2021 postreply 07:37:03

okay, I understand -street0120003- 给 street0120003 发送悄悄话 (0 bytes) () 09/07/2021 postreply 09:24:15

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